摘(zhai)要［目(mu)的(de)］探討翻百草中(zhong)總(zong)黃(huang)酮含(han)量(liang)的(de)測(ce)定(ding)方(fang)法(fa).［方(fang)法(fa)］以硝酸(suan)鋁、亞(ya)硝酸(suan)鈉(na)及氫氧化鈉(na)為(wei)(wei)顯色(se)劑，利用紫外分(fen)光(guang)光(guang)度計測(ce)定(ding)翻白草中(zhong)總(zong)黃(huang)酮的(de)含(han)量(liang).［結果］**佳檢測(ce)波長為(wei)(wei)510nm，蘆丁質量(liang)濃度在20～50mg/L范圍(wei)內時，吸(xi)收度與質量(liang)濃度呈良好的(de)線性關系，回歸方(fang)程為(wei)(wei)y=7457x+0.000平均回收率為(wei)(wei)99.52%，RSD為(wei)(wei)23%.［結論］采用紫外分(fen)光(guang)光(guang)度法(fa)測(ce)定(ding)翻白草中(zhong)總(zong)黃(huang)酮的(de)含(han)量(liang)簡便易行，結果穩定(ding)可靠.

關(guan)鍵詞(ci)黃(huang)酮類分光光度法紫(zi)外線植物(wu)藥用

ABSTRACT：OBJECTIVETostudyassaymethodoftotalflavacontentinPotentilladiscolorbunge.METHODSWithAlCl3NaNO2NaOHaschromogenicagent，totalflavacontentofPotentilladiscolorbungeisdeterminedbyultravioletspectrophotometry.RESULTSTheoptimaldetectivewavelengthwas510nm，andabsorbabilityandmassconcentrationwassatisfactorylinearrelationshipatthemassconcentrationofrutinwasin20～50mg/L.Theregressionequationwasy=7457x＋0.0009，andtheaveragerecoveryratewas99.52%andRSDwas23%.CONCLUSIONUsingultravioletspectrophotometrytodetecttotalflavacontentinPotentilladiscolorbungeissimple，accurate，andsensitive.

Keywords：flavones;spectrophotometry，altravionlet;plants，medicinal

翻白(bai)草為薔薇(wei)科(ke)(ke)植物(wu)的(de)干燥(zao)全草，含鞣質，植株各部分均(jun)含黃酮類化合物(wu)［1］，具有降低血脂、抗菌、止瀉和增強免疫功能(neng)的(de)作用［2］.本研究采用紫外分光光度法對翻白(bai)草中總黃酮的(de)含量(liang)進行(xing)了(le)測定(ding)，旨在為翻白(bai)草藥材及制劑的(de)質量(liang)控制提供(gong)科(ke)(ke)學(xue)依據(ju).

1材料

翻白草全草采集于吉林省龍井市銅佛寺鎮，經延邊大學藥學院生藥學教研室呂惠子副教授鑒定為正品翻白草；蘆丁對照品購自中G藥品生物制品檢定所.電子天平及753型紫外分光光度計均為上海精密科學儀器有限公司產品；REE52C型水浴鍋為北京市醫療設備總廠產品；旋轉薄膜蒸發器為上海亞榮生(sheng)化儀器(qi)廠產品；202型(xing)電熱(re)鼓(gu)風(feng)恒(heng)溫干燥箱(xiang)為江(jiang)蘇恒(heng)豐儀器(qi)廠產品.試劑(ji)均(jun)為AR級.

2方法與結果

1對(dui)照品(pin)溶液的(de)制備精確稱取(qu)在105℃條件下干燥**恒(heng)定(ding)質量(liang)的(de)蘆(lu)丁標準品(pin)10.0mg，置于(yu)100mL容量(liang)瓶中，加入700mL/L乙(yi)醇(chun)(chun)適量(liang)，微(wei)熱(re)溶解，放冷后(hou)再加入700mL/L乙(yi)醇(chun)(chun)稀釋**刻度(du)，搖勻(yun)，得質量(liang)濃度(du)為0.10g/L的(de)蘆(lu)丁對(dui)照品(pin)溶液，低溫(wen)保存，備用.

2供試(shi)品(pin)溶(rong)液(ye)的(de)(de)制備精確稱取翻(fan)白草100g，用700mL/L乙醇(chun)回(hui)流提取，回(hui)收溶(rong)劑(ji)得(de)浸(jin)膏.將(jiang)浸(jin)膏用適量(liang)水溶(rong)解，乙醚脫脂(zhi)，置于冰箱中冷卻(que)，有綠色沉淀產生，將(jiang)過(guo)濾得(de)到的(de)(de)濾液(ye)濃(nong)縮，干(gan)燥得(de)到棕黃色粉末.準確稱取已于105℃條件下(xia)烘(hong)干(gan)**恒定(ding)質量(liang)的(de)(de)黃酮樣品(pin)20.0mg，用700mL/L乙醇(chun)定(ding)容(rong)**100mL.

3測定波長的選擇精確量取對照品溶液和供試品溶液各5mL，分別置于25mL容量瓶中，加入50g/L亞硝酸鈉溶液0mL，搖勻，放置6min，加入100g/L硝酸鋁溶液0mL，搖勻，放置6min，加入40g/L氫氧化鈉溶液10.0mL，再加入水**刻度，搖勻，放置15min，在波長為200～700nm范圍內掃描，結果2種溶液均在510nm處有**大吸收，其他成分對測定無干擾.
4標(biao)準曲線的繪制分別精確(que)吸取(qu)蘆丁標(biao)準液0、0、0、0、0、0mL置(zhi)(zhi)于25mL容量瓶(ping)中，加(jia)入(ru)(ru)50g/L亞硝(xiao)酸鈉(na)溶液0mL，搖勻，放置(zhi)(zhi)6min，加(jia)入(ru)(ru)100g/L硝(xiao)酸鋁溶液0mL，搖勻，放置(zhi)(zhi)6min，加(jia)入(ru)(ru)40g/L氫氧化鈉(na)溶液10.0mL，加(jia)入(ru)(ru)700mL/L乙(yi)醇**刻度，搖勻，放置(zhi)(zhi)15min，進樣，于波(bo)長為510nm處(chu)測(ce)定吸收值.得回歸方程(cheng)：y=7457x+0.000結果表明，測(ce)定蘆丁質(zhi)量濃度在20～50mg/L范(fan)圍內呈良好的線性關系.

5精確度實驗(yan)取對照品溶液(ye)于510nm波優點測定吸收值5次.結果示平均吸收值為0.25RSD為0.54%，表明該方法精確度良好.

6穩(wen)定性試(shi)(shi)驗取供試(shi)(shi)品溶液，于(yu)0、30、60、90、120min時測定吸收(shou)值.結果(guo)表明(ming)，總黃酮與鋁離子形成的(de)紅色絡合物在(zai)1h內穩(wen)定，RSD為21%.

7重現性試驗(yan)(yan)精(jing)確(que)稱(cheng)取藥(yao)材樣品0g，共5份(fen)，平(ping)行試驗(yan)(yan)，于510nm波優點(dian)測(ce)定吸收值，結果(guo)見(jian)RSD為03％.

8加(jia)(jia)樣(yang)回(hui)收率實驗精確稱(cheng)取于105℃條件下干燥**恒定質量的(de)(de)蘆(lu)(lu)丁(ding)對照品(pin)100mg，置于100mL容量瓶中，以(yi)700mL/L乙醇溶解，稀釋**刻度，搖勻，得蘆(lu)(lu)丁(ding)貯備液.取已知總黃(huang)酮含量的(de)(de)5個批次的(de)(de)樣(yang)品(pin)各0.5g，置于100mL磨口錐(zhui)形瓶中，加(jia)(jia)入(ru)上(shang)述蘆(lu)(lu)丁(ding)貯備液10mL，加(jia)(jia)入(ru)700mL/L乙醇30mL，搖勻，測定510nm波優點吸收值，按回(hui)歸方(fang)程(cheng)進行計(ji)算處理(li)，結果見(jian)平均加(jia)(jia)樣(yang)回(hui)收率為99.52%，RSD為23%

以蘆丁為對(dui)(dui)照(zhao)品，以硝(xiao)酸鋁、亞硝(xiao)酸鈉(na)及氫氧化(hua)鈉(na)為顯色劑(ji)，利用紫外分光光度計對(dui)(dui)翻(fan)白草中總黃(huang)酮(tong)的含量進行(xing)測定(ding)的方法具有(you)簡便易行(xing)及結(jie)果穩定(ding)可(ke)靠等優點，同(tong)時(shi)還可(ke)對(dui)(dui)單(dan)個黃(huang)酮(tong)成分進行(xing)分析測定(ding).